外泌体研究一站式解决方案

什么是外泌体？？

外泌体是由细胞分泌的直径为30~150nm的小囊泡，
，
，，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物分子，
，
，在细胞交流间起重要作用。
。。具有减少细胞凋亡、、减轻炎症反应、
、、、促进血管生成
、、抑制纤维化、
、提高组织修复潜力等重要生物学功能。
。其具有以下特征
：

• 典型的“杯托”形态
• 内含的核苷酸包括DNA
  、、mRNA、、、miRNA、、、lncRNA等
• 几乎存在于所有的体液、、组织及细胞间隙中
• 几乎所有的细胞都能分泌外泌体
• 不同细胞分泌的外泌体成分不同

外泌体有哪些功能？？？
？

外泌体携带大量特异性的蛋白质（如细胞因子、、生长因子）以及功能性的mRNA
、、、miRNA等生物活性物质，，，，在体内参与免疫应答、、抗原提呈、、、细胞迁移、、、细胞分化、、肿瘤侵袭、、促血管新生等生理过程，，，与多种疾病的发生和进程密切相关。。由于外泌体的特殊结构和功能
，
，，使得它具有潜在的应用价值，，
，一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标，，
，另一方面也可以作为治疗手段
，，，，未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗。。。。

如何分离外泌体？？？

外泌体的样本来源主要有细胞培养上清、、、血清/血浆、、尿液、、、腹水、
、乳汁、、、脑脊液、、、唾液、
、、、滑液等，，，其中细胞培养上清、
、、、血清/血浆、
、尿液是最常见的来源。。。。如果是使用细胞培养上清
，
，要注意细胞培养中一定不能添加FBS。。。。

外泌体分离方法有很多种
，
，包括超速离心
、、过滤离心、
、、、密度梯度离心、、、、免疫磁珠和商用试剂盒。。但是这么多方法中，，，，我们通常推荐选用超速离心法进行提取和分离，
，因为超速离心方法得到的外泌体不管是从得率还是纯度上都比较好。。。其他方法的特点如下：

1
、
、过滤离心：得率比较低。。。

2
、
、、、密度梯度离心：步骤繁琐，，得率较低。。

3、、、免疫磁珠：特异性比较高，，
，得率较低。
。。。

4
、、、商用试剂盒：价格高，，效果一般。
。。分离出的外泌体电镜和粒径效果差。。。

综合以上
，，，，超速离心法是目前价格适中、、、得率和纯度都能兼得的一种方法。。

如何鉴定外泌体？
？
？

外泌体鉴定是进一步研究外泌体功能和机制的工作基础。。。目前的鉴定方法主要包括透射电子显微镜（TEM）进行形态学观察、
、、
、纳米颗粒追踪分析（NTA）进行粒径和密度分析、、用WB进行蛋白标志物的鉴定。。。WB鉴定包括CD63、、、、CD9
、、、CD81
、、
、TSG101、、、
、Hsp70、、、、syntenin1等。。

透射电镜图

纳米颗粒追踪分析

WB

如何研究外泌体
？？？

外泌体的研究方向主要包括以下三个方面：

1、、、、寻找疾病诊断和预后的分子标志物。
。

2、、、、揭示疾病发病机制，，从微环境角度解释细胞之间通讯促进疾病发生的原因。
。

3
、、外泌体作为药物载体，，实现靶向给药。。。

针对寻找分子标志物
，，通常的研究思路如下：

针对疾病研究，，
，常见的研究思路如下（以外泌体miRNA为例）
：